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一、簡介
PAS(Periodic Acid-Schiff stain)染色又稱過碘酸雪夫染色,糖原染色。一般用來顯示糖元和其它多糖物質(zhì),還可以觀察腎小球基底膜、結(jié)腸杯狀細(xì)胞中性黏液物質(zhì)、阿米巴滋養(yǎng)體和霉菌的著色。其原理是過碘酸能使細(xì)胞內(nèi)的多糖乙二醇基氧化成二醛,再與Schiff氏液的無色品紅結(jié)合,紅色,定位于胞漿上。
二、染色流程
1. 切片常規(guī)脫蠟至水;
2. 蒸餾水洗1-2min;
3. 高碘酸溶液氧化10min;
4. 蒸餾水洗,甩去多余水分;
5. 雪夫(schiff)試劑染色10-15min;
6. 流水沖洗,甩去多余水分;
7. 蘇木素染液染核2-4min;
8. 流水沖洗反藍(lán)3-5min,甩干多余水分;
9. 常規(guī)脫水透明,中性樹膠封固。
三、染色結(jié)果
霉菌、糖原、中性粘液物質(zhì)呈紅色,胞核呈藍(lán)色。
四、注意事項(xiàng)
1. 蘇木素染液建議常溫放置,染色更加;
2. 雪夫試劑臨用前半小時(shí)取出恢復(fù)室溫,未染色試劑出現(xiàn)淡紅色不能使用;
3. 如試劑盒儲存在2-8°C環(huán)境下,染色過程中試劑出現(xiàn)淡紅色屬于正常現(xiàn)象;
4. 雪夫試劑染色時(shí)間隨室溫而定,夏季室溫高,作用10min即可,冬季室溫低,則可延長至20min,雪夫試劑染色要避光;
5. 操作時(shí)做好防護(hù),避免濺眼;
6.超過有效期不可使用。
五、 臨床應(yīng)用
隨著醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展,糖原染色應(yīng)用的范圍更加廣泛,如用以證明與鑒別細(xì)胞內(nèi)空泡狀的性質(zhì) ,心肌病變及其他心血管疾病的診斷 ,糖原累積病診斷和研究 ,糖尿病的診斷和研究 ,用于某些腫瘤的診斷等。除用于糖原的鑒定和黏液的顯示外 ,還可以觀察腎小球基底膜 、結(jié)腸杯狀細(xì)胞 中性黏液物質(zhì) 、阿米巴滋養(yǎng)體和霉菌的著色,為臨床診斷、分類和治療提供了重要的依據(jù)。
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