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VanGieson染色簡(jiǎn)稱VG染色,是一種成熟的結(jié)締組織染色方法,用于區(qū)別膠原纖維和肌纖維。其操作簡(jiǎn)單,結(jié)果可靠,是實(shí)驗(yàn)室常規(guī)特染方法之一。在Van Gieson 染色中品紅和苦味酸的比例關(guān)系一般為1:9,但由于被染色的組織不同以及組織處理方法的不同在實(shí)際應(yīng)用時(shí)應(yīng)根據(jù)染色的實(shí)際效果進(jìn)行必要的調(diào)整以達(dá)到紅黃兩色適當(dāng)?shù)膶?duì)比。
染色步驟:
1、標(biāo)本處理:固定過(guò)的冰凍切切直接用水洗兩到三次;石蠟切片常規(guī)脫蠟至水(參考流程: 二甲苯(I)5min→二甲苯(Ⅱ)5min→100%乙醇2min→95%的乙醇1min→80%乙醇1min→75%乙醇1min→蒸餾水洗2min。)
2、蘇木素染色5-10分鐘。水洗1分鐘。
3、將酸性復(fù)紅和苦味酸以1:9比例混合,配成 VG染色液,染色30-60秒。
4、直接用分化液分化數(shù)秒。
5、脫水,透明,中性樹(shù)膠封片。(參考流程100%乙醇(I)1min→100%乙醇(Ⅱ)1min→二甲苯石碳酸(3:1)1min→二甲苯(I)1min→二甲苯(Ⅱ)1min→中性樹(shù)脂封固) 。
注意事項(xiàng):
1. 穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
2.蘇木素用于細(xì)胞核的染色,為便于組織結(jié)構(gòu)的觀察,染色時(shí)間可根據(jù)結(jié)果自行調(diào)整。
3. VG染色液配制的關(guān)鍵主要是酸性品紅和苦味酸飽和液的比例。請(qǐng)自行根據(jù)結(jié)果調(diào)整。偏紅增加苦味酸比例,偏黃增加品紅比例。
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