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PAS染色又稱過碘酸雪夫染色,糖原染色。一般用來顯示糖元和其它多糖物質(zhì)。
原理:過碘酸能使細(xì)胞內(nèi)的多糖乙二醇基氧化成二醛,再與Schiff氏液的無色品紅結(jié)合,紅色,定位于胞漿上。
細(xì)胞胞漿中存在糖原或多糖類物質(zhì)(如糖蛋白、粘多糖、糖脂、粘蛋白等),過典酸能使細(xì)胞內(nèi)的多糖乙二醇基氧化為二醛基,其與Schiff試劑中的無色品紅結(jié)合后呈現(xiàn)紫紅色,沉積在細(xì)胞內(nèi)多糖所在之處。
染色步驟
1. 石蠟切片脫蠟至水(細(xì)胞涂片,冰凍切片直接水洗);
2. 蒸餾水洗;
3. 過碘酸酒精液10min;
4. 自來水沖洗10min;
5.Schiff氏液10min;
6. 流水沖洗5min;
7.用哈瑞蘇木精或邁耶蘇木精染核3min(細(xì)胞核染色過深可用鹽酸酒精分化);
8. 流水沖洗5min;
9. 常規(guī)脫水、透明、封固。
結(jié)果
PAS陽性為紅色,細(xì)胞核藍(lán)色。
注意事項(xiàng)
1、高典酸溶液為透明溶液,配制后放4度冰箱備用,無法從常規(guī)的顏色辨別高典酸的好壞,需要定期更換;
2、染色試劑均應(yīng)低溫保存,臨用前半小時取出恢復(fù)室溫;
3、Schiff染液染色時間可隨溫度調(diào)整,室溫高可減少染色時間,冬季室溫低,可延長至20 min左右。
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